基本構造は以下の1〜3を順番に連結させたものとなります（図参照）
- プロモーター ：単純に全身で発現させる場合は、プロモーターとしてCAG promoter、ROSA26 promoter、β-actin promoter などが用いられます。
- 発現させたい遺伝子のコーディング配列
- polyA付加配列(3'-UTR) ：3'-UTRのpolyA付加配列としては、rabbit β-globinのものやｂGHのものがよく使われます。
マイクロインジェクションを行うために、プロモーターからpolyA付加配列までを含む断片をアガロースゲルから切り出し精製します。そのため、構築時から切り出しに用いる制限酵素のことを考えたベクターデザインをお願いします。
遺伝子発現制御領域が不明な場合や個体での発現を忠実に再現することを目的として、100kb以上のDNA断片を利用できるBACプラスミドを用いる方法もあります。
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